|
Résumé :
|
L'objectif de notre travail est le développement puis la validation d’une méthode HPLC/DAD phase inverse simple, pour l’analyse de la ribavirine selon les recommandations SFSTP. Les effets de la composition en type et en pourcentage de la phase mobile, débit, pH, le volume d’injection et la longueur d`onde de détection ont été tous étudiés. La séparation chromatographique a été réalisée sur une colonne C18 (250 mm×4,6 mm, 5?m) à une température ambiante avec une phase mobile constituée d'acétonitrile-tampon phosphate KH2PO4 de pH 3.5 (15:85, v/v) , à débit de 0.8 mL/ min et une détection à 254 nm. L’élution de la ribavirine a été observée à 3.69min. La méthode est linéaire dans une gamme de concentration de 0.25 à 1.5 mg/mL. Les coefficients de corrélation (R2) des équations de régression sont supérieurs à 0,999. La fidélité de la méthode est démontrée par la valeur de RSD inférieure à 2%. Aucune interférence au temps de rétention de la ribavirine n’a été observée. Les limites de tolérances à 80% sont comprises entre les limites d'acceptabilité ±5% dans un domaine qui s'étend de 0.75 à 1.25mg/mL où la méthode a prouvé sa validité. Selon les résultats de la validation, la méthode proposée est simple, spécifique, linéaire, fidèle, exacte et peut être appliquée à l'analyse en routine du médicament « ribavirine » avec un excellent taux de recouvrement, une limite de détection à 0,062mg/mL et une limite de quantification à 0.18mg/ml.
|
